鸡传染性支气管炎抗体检测丝瓜绿巨人黑科技破解

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名称：鸡传染性支气管炎抗体检测丝瓜绿巨人黑科技破解
英文名：Diagnostic Kit for chicken Antibodies to Infectious Bronchitis Virus (ELISA)
供应商：绿巨人api破解版黑科技官网生物
产地：国产|进口
检测样本：血清
检测方法：酶联免疫法
产品规格：96T×1/盒、96T×2/盒、96T*5/盒
保质期：12个月
储藏：4～30℃密封干燥保存，忌冷冻，避免阳光直射。
用途：用来检测鸡血清中的禽传染性支气管炎病毒（IBV）抗体

鸡传染性支气管炎抗体检测丝瓜绿巨人黑科技破解 【试验原理】
临床上，传染性支气管炎是一种急性、高度传染的病毒性疾病，任何日龄的鸡都可以感染。IBV的潜伏期为24-72小时。疾病侵害鸡的呼吸系统和泌尿系统。青年鸡表现为急性呼吸道症状及气管损伤。死亡率可高达。血清中的病毒抗体可通过酶联免疫的方法检测。血清中的IBV抗体水平及整个鸡群的免疫状况可用ELISA方法进行监测。
将灭活的抗原包被在微孔板上，加入稀释后的血清并孵育，血清中的抗IBV抗体将与包被在微孔板上的IBV结合，形成IBV抗原-抗体复合物。然后洗掉未结合的物质，加碱性磷酸酶标记的抗鸡IgG的酶标结合物至微孔板中，酶标物将与IBV抗原-抗体复合物结合。孵育后洗掉未结合的结合物，然后加入底物溶液。底物与碱性磷酸酶反应并生成一种黄色的产物，zui后终止反应，将颜色固定。颜色的深浅可用酶标仪（405-410nm）测定。


【一个微孔板所需的试剂的量】
样品平均吸光度值 － 阴性对照吸平均吸光度值
＝样品与阳性对照比值（Sp）
阳性对照平均吸光度值 － 阴性对照平均吸光度值
Sp ×（100）＝ ELISA Unit （EU）              阳性对照值设为100 EU



【结果判定及EU单位说明】
IBV ELISA 值        说明
小于10EUs          IBV抗体为阴性
10-15 EUs           IBV抗体为弱阳性，应被认为经过免疫或暴露于IBV，油乳状疫苗也可能引起非特异性低水平抗体。
15-75 EUs           IBV抗体适度阳性
＞75 EUs            IBV抗体强阳性


【操作步骤】
1. 将试剂回温至室温，通过颠倒和涡旋将试剂混匀。
2. 将1份4×样品稀释液加入到含3份去离子水的容器中，充分混匀，例如，30ml 4×样品稀释液加入到90ml去离子水中。
3. 将1份20×洗涤液加入到含19份去离子水的容器中，充分混匀，例如，25ml 20×洗涤液加入到475ml去离子水中。
4. 稀释前将阳性对照、阴性对照和样品震荡均匀。
5. 阳性对照、阴性对照和样品均需要用样品稀释液稀释后使用。稀释比例为2μl ：800μl。将移液器调到100μl，反复吹打4次使之充分混匀。
6. 将稀释后的阴性对照、阳性对照分别加入微孔中，每种做两个平行，每孔100μl；将稀释后的样品100μl分别加入孔中，室温下静置30分钟。
7. 弃去微孔板中溶液，每孔加入300μl洗涤液洗涤，重复洗涤2次，在洗涤过程中防止酶标板变干。
8. 每孔立即加入100μl结合物，室温静置30分钟。
9. 重复步骤7进行洗板。
10. 每孔立即加入100μl底物，室温静置30分钟。
11. 不要倒掉板内液体，每孔立即加入100μl终止液。
12. 用酶标仪双波读数（405nm或410nm作为主要波长，630nm或650nm为参考波长），计算结果。

 

【注意事项】

1.实验操作时需戴手套、穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度，各种实验废弃物都应按传染物处理。

2.终止液具有腐蚀性，应避免接触皮肤和衣物，如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。

3.微孔板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋，未用完的微孔板需放入有干燥剂的密封袋中保存(包被板开封后请于2～8℃避光保存，使用期限为1个月)。

4.浓缩洗涤液在低温时容易结晶，使用时需恢复至室温以完全溶解。

5.洗涤时各孔均需加满液体，防止孔口有游离酶不能洗净。

6.用于检测的样品应保持新鲜。

7.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。

8.不同批号试剂组分不得混用。

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