知识分享:胎牛血清使用中的常见问题解答
胎牛血清使用中的常见问题解答
胎牛血清是细胞培养中用量大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。今天绿巨人api破解版黑科技官网生物技术小编给大家讲讲胎牛血清在使用中常见的问题解析。
一、保存血清好的办法?
绿巨人免费无线看入口建议血清应保存在-5℃至-20℃。若你一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
二、如何解冻血清才不会使产品质量受损?
绿巨人免费无线看入口建议您将血清从冷冻箱中取出后,先置于2-8℃冰箱中使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。
三、血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?
血清中沉淀物的出现有许多原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性造成的;而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成血清沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。
若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管中,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。绿巨人免费无线看入口不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。
四、何谓热灭活?有必要做热灭活吗?
一般以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活性,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。
实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经过处理的血清对细胞生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。
而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物增多,使研究者认为是微生物的分裂扩增。
因此绿巨人免费无线看入口建议您,若非必须,您可以不需要做热灭活这一步。如此以来,不但节省您宝贵的时间,确保您血清的质量!
五、如何避免沉淀物的出现?
绿巨人免费无线看入口建议您在使用血清的时候,注意正确的血清解冻步骤,并尽量避免灭活血清及长时间的将血清置于高温环境中。
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